遗传繁育

  • 梅花鹿C-myc基因CDS区克隆及序列分析

    吴光松;任丽群;顾丽菊;张芸;林鹏飞;李平;杨蓉;黄维江;毛同辉;燕志宏;

    为了研究梅花鹿鹿茸中C-myc基因的功能结构,采用RT-PCR方法克隆出C-myc基因,并利用网络资源和相关软件对基因序列进行生物信息学分析。结果显示:梅花鹿C-myc基因开放阅读框大小为714 bp,编码237个氨基酸,C-myc基因无信号肽片段,整体表现为亲水性,其亚细结构定位于细胞核中的概率为65.2%;梅花鹿C-myc基因序列与山羊同源性较近,为98%;二级结构预测分析表明C-myc主要由α-螺旋、无规卷曲和延伸链组成。研究结果为今后探究C-myc蛋白质的相关性质及与其他蛋白质的相互作用提供了理论依据,同时为梅花鹿鹿茸生长机制的调控机理研究提供参考。

    2018年10期 v.50;No.399 1-6页 [查看摘要][在线阅读][下载 1740K]
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  • 利用高效液相色谱仪同时测定鲤鱼脑区多种单胺类神经递质

    刘金平;吕世明;谭艾娟;杨可;寇宏;王想;张顺然;

    为了测定鲤鱼脑区8种单胺类神经递质,通过对样品前处理、色谱条件的系列优化,采用高效液相色谱的方法,Agilent SB-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5.0μm),以0.1 mol/L Na Ac溶液(内含0.05 mmol/L Na2-EDTA,5 mmol/L三乙胺,加入HAc调节p H为4.8)、甲醇及去离子水为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0 m L/min,柱温为25℃,激发波长为280 nm,发射波长为330 nm。结果显示:在10 min内,8种单胺类神经递质分离完全,每种物质在一定的浓度范围内线性关系良好(R2>0.999),日内精密度、日间精密度及稳定性均良好,8种物质的添加回收率在91.47%~101.51%之间。结论:本方法操作简便、快速,测定结果准确度较高,可用于鲤鱼脑内8种单胺类递质的测定。

    2018年10期 v.50;No.399 7-11页 [查看摘要][在线阅读][下载 356K]
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  • 从江香猪与苏太猪不同组合杂交性能比较研究

    倪萌萌;谢玲玲;阮涌;蔡刚志;张林华;许厚强;

    为了提高从江香猪生长、繁殖性能,筛选优质香猪杂交组合配套系,以从江香猪(香)和苏太猪(苏)为亲本,开展香♂×苏♀(香苏猪)、苏♂×香♀(苏香猪)杂交试验,在相同饲养管理环境和营养水平下,对杂交猪的繁殖性能和生长性能进行测定,比较不同杂交组合后代的杂交性能。结果显示:繁殖性能方面,香苏猪优于苏香猪,香苏猪平均产仔数9.67头,苏香猪平均产仔数9.33头,差异不显著(P>0.05);初生指标中初生窝重差异显著(P<0.05);21日龄指标中个体重和窝重差异显著(P<0.05);香苏猪平均断奶活仔数为9.56头,苏香猪平均断奶活仔数为8.0头,差异不显著(P>0.05);断奶窝重差异显著(P<0.05);生长性能方面,杂交猪母猪的1月龄体长、体高,2月龄胸围、3月龄体高差异显著(P<0.05),香苏猪母猪除6月龄平均体重低于苏香猪母猪,其余指标均优于苏香猪母猪,随着生长月龄增加,体重、体高、胸围、臀腿围差距在缩小;杂交猪公猪的1月龄的体重、体长、胸围、臀腿围差异显著(P<0.05);2月龄的体重、体高、体长、胸围差异显著(P<0.05);6月龄体长差异显著(P<0.05);香苏猪公猪各项指标均优于苏香猪公猪;其余指标差异不显著(P>0.05)。结果表明:引入苏太猪与本地从江香猪进行杂交改良试验,可显著提高其繁殖性能和生长性能,其中以香苏猪杂交组合效果最好。

    2018年10期 v.50;No.399 12-16页 [查看摘要][在线阅读][下载 113K]
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  • 海南文昌鸡生长激素基因克隆测序及生物信息学分析

    邢漫萍;黄丽丽;王峰;郑心力;林哲敏;晁哲;

    为了克隆文昌鸡的生长激素(growth hormone,GH)基因,获得该基因序列并分析基因结构和相关遗传变异,采用PCR方法扩增GH基因组序列,通过克隆测序寻找基因中的突变位点,利用PCR产物直接测序检测GH基因的多态性。结果显示:在鸡GH基因组中共发现7处碱基突变位点,分别位于GH基因的5'端、第1内含子、第4外显子和第4内含子中;多态性分析发现,在GH基因-391 bp处的A/G突变位点、-360bp处的A/G突变位点、-121 bp处的C/T突变位点上,文昌鸡的优势基因型分别是AA、GG和CC;鸡GH基因启动子区域发现多种潜在的转录因子结合位点,如GATA序列结合因子1(GATA-binding factor 1,GATA-1)、环磷酸腺苷应答元件结合蛋白(c AMP response element-binding protein,CREB)、核因子1(nuclear factor 1,NF-1)、上游刺激因子(upstream stimulatory factor,USF)、增强子结合蛋白α(CCAAT/enhancer binding protein alpha,C/EBPalp)等。本试验为进一步研究文昌鸡GH基因的功能提供了参考。

    2018年10期 v.50;No.399 17-21页 [查看摘要][在线阅读][下载 845K]
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  • 梅花鹿初生茸生长过程中活性差异蛋白表达分析

    胡耀中;赵雨;张梅;刘美欣;刘宇昕;赵大庆;幺宝金;

    为了研究不同生长阶段梅花鹿初生茸活性蛋白表达变化,为鹿茸的质量评价和临床应用提供理论基础,采用蛋白质绝对和相对定量(i TRAQ)技术及超高液相色谱-质谱联用分析技术,结合生物信息学分析手段,对不同生长阶段梅花鹿初生茸活性蛋白进行定性和定量分析,研究不同生长阶段初生茸活性差异表达蛋白的功能分类及表达量变化。结果显示:不同生长阶段的梅花鹿初生茸活性差异表达蛋白(差异倍数≥1.5或≤0.67,且P值≤0.05)主要为软骨低聚基质蛋白、胶原、抗菌肽、S100蛋白和钙调蛋白等蛋白成分;生长初期表达量显著上调的差异表达蛋白主要为软骨低聚基质蛋白、IX/XI型胶原和二聚糖蛋白等细胞外基质蛋白成分,显著下调的差异表达蛋白主要为抗菌肽-2、S100蛋白A2/8/9、骨膜蛋白和血红蛋白亚基α/β等功能蛋白;梅花鹿初生茸生长初期主要为细胞外基质类成分,生长末期主要为功能性蛋白,因此生长末期的初生茸临床应用价值相对较高。研究结果对梅花鹿茸质量评价和临床应用具有一定指导意义。

    2018年10期 v.50;No.399 22-27页 [查看摘要][在线阅读][下载 122K]
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  • 不同冷冻方法对犬细管精液冷冻效果的影响

    吴衍;余盼;王春亮;熊前;叶俊华;

    通过采集6头德国牧羊犬共计24份细管分装精液,分别采用液氮熏蒸法和程序冷冻法进行冷冻,检测解冻后精子的活力、动力学参数、顶体完整率和质膜完整率来比较不同冷冻方法的冷冻效果。结果显示:采用程序冷冻法冷冻后的精子活力(P<0.01)、质膜完整率(P<0.01)和顶体完整率(P<0.05)极显著或显著高于液氮熏蒸法,程序冷冻法解冻后精子动力学参数(平均路径速率、直线速率和曲线速率)高于液氮熏蒸法。结果表明:程序冷冻法优于液氮熏蒸法的冷冻效果。

    2018年10期 v.50;No.399 28-31页 [查看摘要][在线阅读][下载 761K]
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动物营养

  • 保育猪舍空气、粪便、鼻腔黏液及猪组织器官的微生物群落多样性分析

    韩一超;郭慧慧;陈剑波;王树华;武守艳;董春光;

    为了探寻规模化猪场封闭舍内空气微生物和猪体微生物菌群结构、丰度之间的相关性,建立完善的消毒防疫机制,在山西省介休市某规模化猪场选取单栋饲养量为500头的半封闭保育猪舍1栋,分别采集舍内空气(n=9)、鼻腔黏液(n=7)、粪便(n=7)、猪组织器官(n=4)(喉头、气管、淋巴、肺部)共27个样本,对样本中的细菌进行16S r DNA(V3+V4区)高通量测序,分析微生物群落种类及丰度。结果显示:猪舍空气样本中的微生物群落种类和丰度最高,空气样本和猪鼻腔黏液、粪便、猪组织器官样本的微生物组成和相对丰度基本一致,所占比例最高的为厚壁菌门,其次为拟杆菌门,丰度较高的菌种为梭菌、链球菌、普雷沃氏菌、乳酸菌等;猪舍空气样本菌群中丰度较高的病原菌属为梭菌属和链球菌属。结果表明:保育猪舍空气、鼻腔黏液、粪便、猪组织器官中的微生物群落结构及其丰度具有较高的相关性,对猪场疾病防控有一定指导意义。

    2018年10期 v.50;No.399 32-37页 [查看摘要][在线阅读][下载 1543K]
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  • 复方中草药添加剂对羊肉挥发性风味化合物种类和含量的影响

    刘瑞生;王珂;徐建峰;师希雄;张新报;薛春胜;

    为了研究复方中草药添加剂对羊肉中挥发性风味化合物种类和含量的影响,将36只3月龄左右萨福克与小尾寒羊杂交一代公羔,随机均分为2个处理,每个处理3个重复,每个重复6只羊,对照组饲喂精料,试验组在精料中添加1.5%复方中草药添加剂进行育肥,试验期90 d,试验结束后每个重复选择3只肉羊屠宰,测定肉羊中挥发性风味化合物种类和含量含量。结果显示:羊肉中挥发性风味化合物种类试验组比对照组增加18种,含量提高55.12个百分点(其中影响羊肉风味的醛类、醇类、酮类、烃类和酯类分别增加3、3、1、10和1种,相对含量分别提高10.17、2.91、2.63、37.25和3.16个百分点)。结果表明:精料中添加复方中草药添加剂可以明显改善羊肉风味。

    2018年10期 v.50;No.399 38-42页 [查看摘要][在线阅读][下载 275K]
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基础兽医

  • 乌金猪、青峪猪和成华猪免疫器官多种免疫调节基因表达的比较

    张敬梅;顾亦韧;李江淩;陈晓晖;曾凯;吕学斌;高荣;

    为了阐明乌金猪、青峪猪和成华猪这些地方猪种繁殖力高、抗病耐逆性强等分子免疫特征,采用实时荧光定量PCR方法,研究乌金猪、青峪猪、成华猪与约克夏猪的胸腺、脾脏、扁桃体、肠系膜淋巴结和肺门淋巴结中的选择素-L(CD62L)、转化生长因子-β1(TGF-β1)和白细胞介素(IL-2、IL-4、IL-6、IL-7、IL-12、IL-15)mRNA的表达差异。结果显示:成华猪胸腺IL-2、IL-12、IL-6、IL-7、CD62L,脾脏IL-15,扁桃体CD62L,肠系膜淋巴结IL-2,肺门淋巴结TGF-β1 mRNA表达量均显著高于其他猪种(P<0.05);乌金猪胸腺TGF-β1,脾脏CD62L,扁桃体IL-6、IL-7,肠系膜淋巴结IL-4 mRNA表达量显著高于其他猪种(P<0.05);青峪猪肺门淋巴结IL-4、CD62L mRNA表达量显著高于其他猪种(P<0.05)。研究结果为培育抗病力强的动物新品种和筛选抗病分子标记提供科学依据。

    2018年10期 v.50;No.399 43-48页 [查看摘要][在线阅读][下载 784K]
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  • 梅花鹿MMP-2催化域的基因克隆及原核表达

    高云鹏;王敏;王新宇;赵雨;王佳雯;

    为了研究基质金属蛋白酶2(MMP-2)与鹿茸生长发育之间的关系,构建MMP-2催化域原核表达载体,采用RT-PCR方法从鹿茸c DNA中扩增MMP-2的催化域基因,使用NdeⅠ和NotⅠ酶切位点连入原核表达载体p ET30a并进行诱导表达。结果显示:梅花鹿MMP-2的催化域与牛、山羊、大鼠、人、马、猪和绵羊等多个物种的MMP-2催化域进化上较为保守,氨基酸同源性分别为98.4%、99.5%、94.0%、96.2%、95.9%、96.4%和99.2%;重组表达的MMP-2 CD带有His标签,蛋白共有377个氨基酸,预测大小为42.04 ku,理论等电点为4.95;通过转化BL21感受态细胞和IPTG诱导,成功表达了目的蛋白,约占菌体蛋白的80%;经过SDS-PAGE检测和免疫印迹分析,发现目的蛋白主要表达在包涵体中。本试验为后续蛋白纯化及活性检测,进一步研究MMP-2在鹿茸生长中的作用提供了理论依据。

    2018年10期 v.50;No.399 49-53页 [查看摘要][在线阅读][下载 2255K]
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  • 泰地罗新注射液在藏系羊体内的药物代谢动力学研究

    边巴次仁;何斌;尼玛仓决;赤列旺久;常瑛;冉志平;

    为研究泰地罗新注射液在藏系羊体内的药物动力学特征,了解其在藏系羊体内的吸收、分布、转化及排泄规律,为泰地罗新注射液的临床合理用药提供参考,选取8只藏系羊,泰地罗新4 mg/kg体重单剂量肌内注射给药,不同时间点采集藏系羊血液,利用高效液相色谱法测定血浆中药物浓度。结果显示:给药后泰地罗新在藏系羊体内的药-时曲线符合有吸收三室开放模型,其主要药动学参数为:达峰时间(T_(max))为(0.723±0.186)h,最高血药浓度(C_(max))为(0.769±0.231)μg/m L,半衰期(t_(1/2))为(86.525±10.547)h,表观分布容积(Vd)为(15.298±2.564)m L/kg,药时曲线下面积(AUC)为(28.738±3.452)μg·h/m L。结果表明:泰地罗新注射给药后,在藏系羊体内吸收迅速,消除较为缓慢。

    2018年10期 v.50;No.399 54-57页 [查看摘要][在线阅读][下载 353K]
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  • 氟苯尼考纳米乳含量测定方法的建立及稳定性研究

    时菲菲;秦枫;马琪伦;魏亚兰;李杨;

    为了建立高效液相色谱法测定氟苯尼考纳米乳中氟苯尼考含量的方法并对其稳定性进行研究,采用Iner Sustain C18(5μm,4.6 mm×250mm)色谱柱,以乙腈-水-磷酸(35∶65∶0.02,V/V/V)为流动相,流速1.0 m L/min,检测波长224 nm,进样量20μL,柱温25℃,考察方法的系统适用性、线性、精密度、加样回收率等,并通过影响因素试验及加速试验考察氟苯尼考纳米乳的稳定性。结果显示:氟苯尼考纳米乳在该色谱条件下,系统适应性良好,在4.12~67.74μg/m L浓度范围内线性关系良好,线性回归方程为:A=49 295C+2 967.2(R2=0.999 9),平均加样回收率分别为101.48%(n=6),RSD为0.26%;氟苯尼考纳米乳在50℃、75%相对湿度(RH)条件下稳定。结果表明:建立的含量检查方法专属性强、准确度高、精密度、重复性良好,适用于氟苯尼考纳米乳含量测定,制备的氟苯尼考纳米乳稳定性良好,强光对其含量略有影响。

    2018年10期 v.50;No.399 58-62页 [查看摘要][在线阅读][下载 340K]
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  • 姜黄素通过激活自噬影响猪前体脂肪细胞脂质沉积的研究

    袁嘉晟;沈如玉;贺婷婷;高昕星;邢华;潘士锋;

    为了探讨姜黄素处理对猪前体脂肪细胞脂质沉积的影响及其自噬激活机制在其中所起的作用,采用断奶仔猪皮下脂肪分离获得前体脂肪细胞,增殖培养至85%~95%融合,利用终浓度为0.1 mmol/L 3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(IBMX)、0.25μmol/L地塞米松(DEX)、5μg/m L胰岛素(Insulin)的诱导分化液诱导分化,同时给予姜黄素处理,随机分为2组:对照组(诱导分化液+姜黄素溶解试剂DMSO)和处理组(诱导分化液+10μmol/L姜黄素),48 h后收集细胞进行分析。结果显示:与对照组细胞相比,10μmol/L姜黄素处理对细胞增殖能力没有明显影响(P=0.82),但能极显著降低脂肪细胞中甘油三酯(TG)的沉积量(P<0.01);与对照组相比,10μmol/L姜黄素处理能极显著增加自噬标志基因(LC3)和溶酶体酸性脂肪酶(Lipa)mRNA的表达(P<0.01);Western blot显示,10μmol/L姜黄素处理能显著增加LC3的表达(P<0.05),并促进LC3-I向LC3-II的转化。结果表明:姜黄素处理能显著抑制猪脂肪细胞脂质沉积,该过程可能是通过自噬激活机制来实现的,研究结果为畜牧兽医生产中姜黄素的应用提供理论支持。

    2018年10期 v.50;No.399 63-67页 [查看摘要][在线阅读][下载 1594K]
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  • 磷酸替米考星对肺炎支原体自然感染猪的治疗试验

    吴宁;张晓辉;鲍恩东;雷向东;孙阳阳;潘进喆;

    为了评价磷酸替米考星对仔猪自然感染肺炎支原体的治疗效果,选取支原体肺炎患猪,10%磷酸替米考星可溶性粉混饮给药,每日1次,连用7 d,通过检测各组受试猪死亡率、治愈率、有效率、增重效果、感染仔猪的肺部病变评分等指标对受试药物的临床治疗效果进行研究。结果显示:10%磷酸替米考星可溶性粉80 mg/L剂量组治愈率最佳,与其他2个药物治疗组相比差异显著(P<0.05);药物治疗有效率10%磷酸替米考星可溶性粉80 mg/L剂量组最高,但3个药物治疗组之间差异不显著(P>0.05);10%磷酸替米考星可溶性粉60~80 mg/L能有效改善猪群相对增重率(P<0.05),但仍显著低于健康猪群(P<0.05);10%磷酸替米考星可溶性粉60~80 mg/L剂量组、10%替米考星可溶性粉组均可明显降低病猪肺脏病变评分(P<0.05)。结果表明:60~80 mg/L剂量的10%磷酸替米考星可溶性粉饮水治疗猪自然感染肺炎支原体的效果显著,且治疗效果与10%替米考星可溶性粉相当。

    2018年10期 v.50;No.399 68-72页 [查看摘要][在线阅读][下载 122K]
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预防兽医

  • 猪圆环病毒2型Cap蛋白双抗体夹心ELISA定量检测方法的建立

    许兆君;魏荣荣;李玉安;杨豫蒙;姜晓芳;李琛;叶正琴;丁国伟;宋庆庆;

    为了建立起双抗体夹心ELISA定量测核衣壳蛋白(caspid protein,Cap)抗原方法,采用氯化铯密度梯度超速离心方法制备猪圆环病毒2型Cap蛋白标准品,制备出针对PCV2-Cap单克隆抗体及PCV2-Cap多克隆抗体,筛选最佳包被抗体和酶标抗体的稀释度,绘制标准曲线,验证方法,并应用该方法对不同转移载体构建的PCV2-Cap蛋白随时间变化的表达量进行测定。结果显示:最佳包被抗体和酶标抗体的稀释度均为1∶10 000,标准曲线的范围是15.6~250 ng/m L,线性相关系数≥0.99,准确性为(103.46±12.50)%,特异性良好;检测不同转移载体构建的Cap表达量随时间的变化,发现Cap含量接种后24 h开始表达,72 h达到高峰,呈S形曲线增长模式。结果表明:已建立的双抗体夹心ELISA定量测Cap抗原方法灵敏度、精密性和准确性均符合研究要求。

    2018年10期 v.50;No.399 73-77页 [查看摘要][在线阅读][下载 312K]
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  • 基于恒温隔绝式荧光PCR技术的猪流行性腹泻病毒检测方法的建立及应用

    于新友;李天芝;吴信明;王金良;

    为建立猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)快速检测方法,参照Gen Bank中PEDV的N基因序列,设计引物及TaqMan探针,优化反应条件,建立了快速检测PEDV的荧光RT-PCR方法,并验证该法的敏感度、特异性和重复性。结果显示:该方法最佳反应体系为上游引物各1.5μL,下游引物各1.8μL,探针0.7μL,酶1μL,缓冲液12.5μL,模板2μL,补足DEPC水至25μL,获得的标准曲线方程为Ct=-3.15×lg拷贝数+31.72,检测PEDV的敏感度可达0.32 TCID50/100μL,特异性好,对其他猪常见病毒检测结果均为阴性。结果表明:该方法适合猪流行性腹泻快速检测,为该病的诊断和防控奠定了基础。

    2018年10期 v.50;No.399 78-81页 [查看摘要][在线阅读][下载 240K]
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  • 山羊伪结核棒状杆菌TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立和初步应用

    马玉馨;李文贵;郑国英;邬培昆;邵庆勇;李志明;高华峰;

    为了快速检测无临床症状的山羊是否感染山羊伪结核棒状杆菌(Corynebacterium pseudotuberculosis),根据Gen Bank中伪结核棒状杆菌磷脂酶D(phospholipase D,PLD)基因序列,分别设计1对特异性引物和Taq Man探针,经过反应条件和体系优化,测定特异性、敏感性和稳定性,建立山羊伪结核病Taq Man荧光定量PCR检测方法,并对54份临床样品进行检测。结果显示:建立的山羊伪结核棒状杆菌方法具有很好的特异性,在20μL扩增体系中,引物浓度为0.20μmol/m L,探针浓度为0.45μmol/m L,退火温度59℃时最佳;最低可检测出4.6×102个拷贝数的细菌DNA,标准曲线相关系数是0.996。同时,对Taq Man荧光定量PCR和常规PCR进行了比较,前者的敏感性是后者的1 000倍;对54份临床样品进行检测,Taq Man荧光定量PCR检出的阳性率为68.5%(37/54),常规PCR检出的阳性率为53.7%(29/54)。研究表明:Taq Man荧光定量PCR法检出率较高,有特异、敏感且快速的特点,适用于临床样品的检测。

    2018年10期 v.50;No.399 82-87页 [查看摘要][在线阅读][下载 1007K]
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  • 江苏及周边地区猪流行性腹泻病毒的检测及其ORF3基因序列分析

    焦点;孙杰;俞正玉;郭容利;朱琳;范宝超;李郁;何孔旺;李彬;

    根据江苏省及周边地区猪场2014年出现的临床腹泻病例,对发病猪送检病料进行了猪流行性腹泻病病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、轮状病毒(RV)这3种重要病毒进行检测,同时分析PEDV的ORF3基因序列。结果显示:建立的三重RT-PCR检测方法,检测下限可达104拷贝/μL的混合质粒,特异性好,没有扩增出其他病毒。PEDV感染率高达36.3%,TGEV与RV的感染率均不足1%,此外还存在1例PEDV与TGEV混合感染的情况。对部分PEDV阳性病料的ORF3基因进行序列分析,发现核苷酸(氨基酸)的同源性为95.9%!100%(96.9%!100%),且与疫苗毒株遗传关系较远。该结果明确了江苏及周边地区的仔猪病毒性腹泻病原,为该病的防控提供参考依据。

    2018年10期 v.50;No.399 88-94页 [查看摘要][在线阅读][下载 2019K]
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  • 猪伪狂犬病病毒检测基因芯片的构建

    吴凤笋;吕玉金;刘玲玲;刘胜利;张中华;柳增善;

    为了研制猪伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)诊断DNA芯片,选取PRV g E基因设计引物与探针以构建DNA芯片,同时对基因芯片的探针质量浓度、Poly(d T)的添加、杂交温度、杂交时间进行筛选。结果显示:寡核苷酸探针的浓度在1~30μmol/L之间对杂交信号的影响不大;寡核苷酸探针的氨基化端加上Poly(d T),49.5℃杂交1 h可以获得较好的杂交信号;敏感性试验结果显示,敏感性可达1×10-6ng级,与普通PCR相比高10倍,该芯片具有特异性高、灵敏度高等优点;应用猪伪狂犬病毒检测基因芯片检测20份临床病料,与PCR结果符合率达100%。

    2018年10期 v.50;No.399 95-99页 [查看摘要][在线阅读][下载 3159K]
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  • 贵州省鸡心包积液-肝炎综合征实验室诊断与病原基因分型

    张云丹;杨源;王军;岳筠;文明;周碧君;程振涛;李涛;

    为证实鸡心包积液-肝炎综合征(hydropericardium hepatitissyndrome,HHS)在贵州省的流行、病原遗传变异和基因分型情况,对贵州首个疑似HHS病例进行实验室检测,并基于Hexon基因进行病原基因分型。结果显示:病例组织材料中PCR扩增获得约295 bp特异性Hexon基因片段;基于Hexon基因分型显示,本病例病原与国内外报道的禽腺病毒Ⅰ群血清4型(FAd V-4)同源性高达100%,与禽腺病毒Ⅰ群代表株CELO株(U46933)同源性达到64.5%;系统进化分析显示,FAd V-4贵州流行株与禽腺病毒Ⅰ群代表株CELO株和FAd V-4国内外流行株均处于同一进化分支,而与禽腺病毒Ⅱ群和禽腺病毒Ⅲ群处于不同进化分支。结果表明:本病例确为贵州省首次报道HHS病例,病原基因分型为禽腺病毒Ⅰ群血清4型,研究结果为贵州省HHS防控提供参考。

    2018年10期 v.50;No.399 100-104页 [查看摘要][在线阅读][下载 583K]
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信息

  • 庆贺《畜牧与兽医》连续第8次入编《中文核心期刊要目总览》

    本刊编辑部;

    <正>在最新由北京大学出版社出版的《中文核心期刊要目总览》2017年版(即第8版)中,《畜牧与兽医》连续第8次入编"畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂(除草地学、草原学)"类核心期刊。《要目总览》按《中国图书馆分类法》的学科体系,列出了78个学科的核心期刊表,并逐一对核心期刊进行了著录。著录项目包括:题名、并列题名、主办单位、创刊时间、出版周期、学科分类号、ISSN号、CN号、邮发代号、编辑

    2018年10期 v.50;No.399 104页 [查看摘要][在线阅读][下载 43K]
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预防兽医

  • 2株牛病毒性腹泻病毒基因2型的分离鉴定

    舒鑫;董心仪;毛立;张聪;傅欣玲;李文良;

    为了对疑似污染牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)的牛肾细胞系(MDBK)进行检测并分离鉴定病毒,采用RTPCR、间接免疫荧光、电镜观察、病毒序列的分子进化分析等方法对细胞中污染的BVDV进行鉴定。结果显示:从2株不同来源的污染细胞中检测到2株BVDV(C201602和C201704),RT-PCR均可扩增得到288 bp的5'-UTR片段,进化分析表明其均为BVDV-2a型;2株病毒接种MDBK细胞传代,均无细胞病变产生,测得第3代病毒效价分别为105和104.5TCID50/m L,电镜观察病毒为50~60 nm的圆形有囊膜颗粒。研究表明,BVDV-2具有潜在的流行风险,为试验材料中BVDV-2污染的风险控制提出了警示。

    2018年10期 v.50;No.399 105-109页 [查看摘要][在线阅读][下载 982K]
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  • 猪流行性腹泻病毒中和表位区S1D的原核表达及免疫原性分析

    张鸿鑫;韩昊莹;侯华琳;赵宇;郑兰兰;杨明凡;陈红英;

    为了研究猪流行性腹泻病毒(PEDV)S1蛋白中和表位区S1D的免疫原性,根据PEDV河南株(Gen Bank:YK649107)S1基因序列,设计1对特异性引物,PCR扩增S1D片段,克隆到p ET-28a(+)中,构建原核表达载体,经优化的IPTG浓度诱导后进行SDS-PAGE分析,利用His标签的特性重组蛋白进行纯化及Western blot分析。结果显示:中和表位S1D片段在p ET-28a(+)中高效表达;Western blot证明重组蛋白可以与PEDV阳性血清产生特异性反应;用纯化的蛋白免疫新西兰白兔,抗体水平升高,表明重组蛋白具有良好的免疫原性。

    2018年10期 v.50;No.399 110-114页 [查看摘要][在线阅读][下载 429K]
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临床兽医

  • 猪源产肠毒素性大肠杆菌耐热肠毒素STⅡ基因荧光定量PCR检测试剂盒的研制

    姜玲玲;杨丽娟;伍春红;卢昱希;张涛;余波;

    为建立猪源产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)的快速准确诊断方法,根据Gen Bank收录的ETEC耐热肠毒素(STⅡ)基因序列设计1对特异性引物,采用SYBR GreenⅠ荧光染料建立ETEC荧光定量PCR诊断试剂盒,并验证该检测法的敏感度、特异性、重复性及试剂盒长期保存的稳定性。结果显示:该诊断试剂盒的最低灵敏限度达1.0×101拷贝/μL,特异性强,对羊源、牛源产肠毒素性大肠杆菌基因未检出;用该试剂盒检测猪场分离的149株临床样品,同时与传统的分离培养后普通PCR比较,该方法检出率高;试剂盒于-20℃保存3~6个月对阳性标准品拷贝数无影响。本研究研制的试剂盒在临床检测大肠杆菌比传统检测方法快且结果表明建立的试剂盒适合于ETEC的检测,为该病的快速诊断和防治提供基础。

    2018年10期 v.50;No.399 115-118页 [查看摘要][在线阅读][下载 490K]
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  • 新疆焉耆县羊源葡萄球菌耐药分析及耐药基因检测

    马木尔·阿克木汉;姚晓慧;王舒丰;王凯;夏利宁;

    为了对新疆焉耆地区羊源葡萄球菌耐药性及其携带的相关耐药基因情况进行检测,为该养殖场今后合理用药提供科学依据,采用微量肉汤稀释法对分离的275株葡萄球菌进行11种常用抗菌药物的药敏试验,并检测了部分相关耐药基因(cfr、fex A、mec A、tet K和tet M)。结果显示:分离的葡萄球菌对青霉素的耐药率高达90.4%,其次为苯唑西林,耐药率为69.1%,对其他被检药物的耐药率在1.4%~38.6%之间;基因检测显示,2株菌携带cfr基因(0.7%,2/275),14株菌携带fex A基因(5.1%,14/275),3株菌携带mec A基因(1.1%,3/275),5株菌携带tet K基因(1.8%,5/275),所有菌株均携带tet M基因(100%,275/275)。结果表明:新疆焉耆地区羊源葡萄球菌对青霉素和苯唑西林高度耐药,提示临床用药应根据药敏试验结果选用敏感药物,如庆大霉素、利福平等,缩短治疗周期和提高治疗效果;耐药基因的检出表明耐药性转移的风险增高,应加强对该地区养殖场的耐药监测。

    2018年10期 v.50;No.399 119-123页 [查看摘要][在线阅读][下载 346K]
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  • 1例犬黄曲霉毒素中毒的诊断分析

    李赛慧;闵雯嫣;张信军;石火英;刘宗平;卞建春;刘学忠;袁燕;顾建红;

    为进一步研究犬黄曲霉毒素中毒的特征以及为临床上犬的黄曲霉毒素中毒的诊断提供参考,针对江苏省连云港市某犬场的柯基犬和斗牛犬黄曲霉毒素中毒的病例,采用病史和流行病学调查、临床症状观察、血常规和血液生化检测、病理剖检以及组织切片制作、酶联免疫试剂盒检测黄曲霉毒素等方法,对中毒犬进行诊断分析。结果显示:饲料中检测出黄曲霉毒素,中毒犬白细胞均高于正常值,肝脏病变严重,胃肠黏膜出血,肝细胞和肾小管上皮细胞发生脂肪变性,柯基犬死亡率高达24%。结果表明:该场犬发生了以肝脏病变为主的黄曲霉毒素急性中毒。

    2018年10期 v.50;No.399 124-127页 [查看摘要][在线阅读][下载 1251K]
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专题论述

  • 奶牛子宫和卵巢常见疾病的B超鉴别诊断

    肖银霞;许晓玲;白佳桦;冯涛;肖霖力;宋玉清;刘彦;

    B型超声诊断技术对奶牛的子宫、卵巢疾病的诊断具有直观、快速、准确和无损伤等特点,对久配不孕的奶牛进行B型超声检查,持续观察子宫和卵巢的变化,根据子宫和卵巢卵泡、黄体的回声形态及回声状态来判定奶牛的子宫内膜炎、子宫积液、卵巢囊肿、卵巢静止和持久黄体等生殖障碍的情况,显著提高了奶牛某些不孕症判定的准确性,实时监测子宫和卵巢的状态,为奶牛子宫和卵巢疾病的诊治奠定了良好的基础。

    2018年10期 v.50;No.399 128-131页 [查看摘要][在线阅读][下载 1784K]
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  • 多杀性巴氏杆菌免疫逃避机制

    邹灵秀;朱剑宗;潘雨;邓彦飞;

    多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)引起多种畜禽巴氏杆菌病,严重影响养殖业发展。该菌为了能在宿主体内建立感染,已具备了多样化的和复杂的策略来逃避宿主的免疫应答。已发现的多杀性巴氏杆菌的免疫逃避机制包括干扰或逃避宿主的吞噬作用,抵抗中性粒细胞、抗菌肽、补体介导的杀伤作用,降解免疫球蛋白或封闭抗体活性,形成生物膜等,除此之外,多杀性巴氏杆菌毒素(PMT)还参与多种免疫逃避活动。本文就针对多杀性巴氏杆菌的免疫逃避机制做一综述。

    2018年10期 v.50;No.399 132-136页 [查看摘要][在线阅读][下载 135K]
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  • 早期菌群干预在仔猪肠道健康中的应用

    徐菊美;范觉鑫;张颖;江书忠;肖淑华;

    仔猪肠道健康与仔猪的生长性能息息相关。肠道微生物在对营养物质的消化吸收、维护仔猪肠道屏障的完整性和刺激肠黏膜免疫的发育方面发挥着重要的作用。断奶仔猪肠道内有害菌的大量增殖,破坏了仔猪肠道的菌群平衡,引发仔猪腹泻。因此,尽早建立稳定的微生物群对于维护仔猪肠道健康显得尤为重要。本文通过不同方法干预仔猪肠道微生物的建立进行了综述,并分析比较了各方法的利弊,旨在为广大养殖户提供理论依据。

    2018年10期 v.50;No.399 137-141页 [查看摘要][在线阅读][下载 135K]
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