遗传繁育

  • 基于GC/TOF-MS技术研究猪健康大卵泡和中等卵泡液的代谢变化

    程玲;王文绍;索川;马志禹;李俊;安娜;雷治海;苏娟;

    为研究国内猪卵巢卵泡液的代谢组分轮廓特征以及由中等卵泡发育为大卵泡过程中的代谢成分变化,运用气相色谱-飞行时间质谱联用技术(GC/TOF-MS)对采自屠宰场三元杂交母猪卵巢中的11份大卵泡液(直径5~8 mm)和12份中等卵泡液(直径3~5 mm)进行代谢物检测,并采用主成分分析(PCA)及偏最小二乘判别法(PLS-DA)分析方法对数据进行多元统计分析。结果显示:猪大卵泡与中等卵泡液的代谢谱明显不同,共有33种差异代谢物与卵泡大小密切相关;与中等卵泡液相比,大卵泡液中α-酮戊二酸、葡萄糖1-磷酸、脯氨酸的浓度极显著升高(P<0.01),葡萄糖浓度显著升高(P<0.05),其他如氨基酸、脂肪酸在内的绝大多数代谢物浓度均显著性降低(P<0.05);代谢物通路富集分析显示差异代谢物主要与三羧酸循环、糖代谢、氨基酸代谢和核苷酸代谢等代谢通路相关。结果表明:应用GC/TOF-MS技术可有效筛选出猪不同大小卵泡之间的卵泡液差异代谢物,这些差异代谢物提示卵泡发育过程涉及很多代谢通路的变化,这为今后利用人工干预手段对卵泡发育进行调控提供参考依据,同时为猪卵母细胞发育潜能和早期胚胎发育研究提供一个新思路。

    2018年06期 v.50;No.395 1-6页 [查看摘要][在线阅读][下载 1684K]
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  • 不同周龄公鸡鸡冠组织学观察和BMP2、CHADL基因的表达分析

    王琨;刘一帆;章明;邹剑敏;屠云洁;姬改革;巨晓军;束婧婷;虞德兵;

    为了研究不同周龄公鸡鸡冠组织结构变化和鸡冠发育候选基因骨形态发生蛋白2(BMP2)和软骨蛋白样蛋白(CHADL)的表达规律,选用青年期(5、9、13周龄)、性成熟启动期(17周龄)和性成熟完全期(26周龄)的青脚麻鸡公鸡各5只,测量鸡冠发育指标,同时屠宰后制作鸡冠组织石蜡切片,观察比较不同周龄的组织形态特征;采用实时荧光定量PCR技术定量分析各周龄公鸡鸡冠组织BMP2和CHADL的相对表达量。结果显示:鸡冠随着周龄增加持续发育,在性成熟启动后(17~26周龄)增速加快;随着鸡冠的发育,外周真皮层的毛细血管逐渐增大且互相吻合,血管内红细胞数量增多;中间真皮层的胶原纤维网不断疏松,成纤维细胞有减少的趋势;BMP2基因的表达量呈现先升高后降低的趋势,在13周龄时表达量最高(P<0.05);而CHADL基因的表达量随着鸡冠发育逐渐升高(P<0.05)。结果表明:BMP2和CHADL分别在鸡冠发育过程中发挥了抑制/促进鸡冠发育的作用;性成熟启动后鸡冠组织的形态会有较大变化。

    2018年06期 v.50;No.395 7-11页 [查看摘要][在线阅读][下载 3108K]
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  • 猪速激肽3基因启动子活性及其表达调控的初步研究

    李忠慧;袁晓龙;邢燕;林长光;张哲;张豪;李加琪;

    为了确定猪速激肽3基因(tachykinin3,TAC3)核心启动子区域,探索作用于该区域的转录因子对TAC3的调控作用,以猪耳组织DNA为模板,PCR扩增TAC3基因5'端不同长度缺失片段,并构建至p GL3-basic载体,转染猪卵巢颗粒细胞,通过双荧光素酶活性分析确定核心启动子区域,染色质免疫共沉淀技术(Ch IP)验证转录因子与基因启动子区的作用,构建转录因子超表达载体和小干扰RNA(siRNA)转染至猪卵巢颗粒细胞,qRT-PCR检测TAC3基因mRNA表达变化。结果显示:成功构建了TAC3基因5'端不同长度缺失片段,通过双荧光素酶报告系统分析发现,-1 310/-544区域为TAC3基因的核心启动子区,-2 486/-1 633区域可能存在负向调控元件,-1 310/-544区域可能存在正向调控元件。Ch IP检测发现转录因子C/EBPβ和YY1分别结合在TAC3基因的-653/-639和-873/-856区域;超表达C/EBPβ和YY1后,TAC3基因启动子活性显著升高(P<0.05)、mRNA表达水平显著上调(P<0.01);干扰C/EBPβ后,TAC3基因mRNA表达水平显著下调(P<0.01);干扰YY1后,TAC3基因启动子活性显著降低(P<0.05)。结果表明:转录因子C/EBPβ、YY1结合在TAC3基因的核心启动子区域,促进TAC3基因的转录活性。

    2018年06期 v.50;No.395 12-18页 [查看摘要][在线阅读][下载 1100K]
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动物营养

  • 利用高效液相色谱仪测定猪乳中乳清蛋白含量的方法及其应用

    杨怀荣;田时;赵道远;胡平;王珏;汪晶;吕波;

    为了建立快速准确检测猪乳中溶菌酶、乳铁蛋白、α-乳白蛋白、血清白蛋白和β-乳球蛋白高效液相色谱方法,采用0.1%三氟乙酸水溶液为流动相A,0.1%三氟乙酸乙腈溶液为流动相B进行程序洗脱,用Xbridge~(TM) Sneild RP C18色谱柱对α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和溶菌酶进行分离检测,用Supelcosil C18色谱柱对乳铁蛋白和血清白蛋白进行分离检测。结果显示:5种乳清蛋白分离良好,在25~1 000 mg·L~(-1)范围内呈良好线性,标准曲线回归系数均大于0.99,RSD小于5%,回收率在91%~97%,溶菌酶、乳铁蛋白、α-乳白蛋白、血清白蛋白和β-乳球蛋白的检测限分别为0.2、4.0、0.6、0.3和1.0 mg·L~(-1);对猪乳中乳清蛋白进行测定显示,β-乳球蛋白、溶菌酶、乳铁蛋白和血清白蛋白含量在母猪分娩后16 d内逐渐降低,其含量均在母猪分娩后第1天最高,分别为17.2、0.224、2.0和15.6 g·L~(-1),在第16天含量最低,分别为5.6、0.092、0.5和3.6 g·L~(-1);α-乳白蛋白含量在母猪分娩后逐渐升高,在第7天时含量达到最高为3.3 g·L~(-1),随后降低,保持在3.1 g·L~(-1)。结果表明:建立的乳清蛋白高效液相色谱法,能够快速准确检测猪乳中5种乳清蛋白的含量。

    2018年06期 v.50;No.395 19-24页 [查看摘要][在线阅读][下载 359K]
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  • 皖东牛对湿热气候适应的散热调节特征

    崔志浩;魏明;颜培实;

    为了探究皖东牛在不同温度下的散热特征,选取12头平均体重为(417±10.08)kg的健康皖东公牛,分别测定冬夏两季牛舍环境温度(Ta)、试验牛皮温(Ts)、直肠温度(RT)、呼吸频率(RR)以及蒸发散热(He)。结果显示:Ts随着Ta的升高而升高,Ta在24℃以下时,Ts=0.839Ta+12.133(P<0.01,r=0.940),Ta每上升1℃,Ts上升0.839℃;在24℃以上Ts=0.485Ta+20.68(P<0.01,r=0.842),斜率变小,Ts上升速度减慢;冬季的呼吸数在20次/min之下,极显著低于夏季(P<0.01),夏季RR=5.534Ta-143.3(P<0.01,r=0.361),RR随气温升高而大幅度增加;Ta在24℃以下时He=26.61Ta-340.3(P<0.01,r=0.82),在24℃以上时He=60.88Ta-1 115(P<0.01,r=0.98);皖东牛的RT在夏季显著高于冬季(P<0.05),独立于RR和Ts之外,保持稳定。结果表明:皖东牛可根据不同温度维持自身体热平衡,冬季通过降低Ts,夏季在24℃以上皖东牛采用显汗蒸发,高温条件下,蒸发与高皮温共同维持散热。

    2018年06期 v.50;No.395 25-28页 [查看摘要][在线阅读][下载 309K]
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  • 日粮NFC/NDF水平对泌乳后期奶牛生产性能、血液生化及抗氧化指标的影响

    张林;李烨青;王泽栋;曾涵芳;陈孟姣;韩兆玉;

    为了研究不同非纤维性碳水化合物/中性洗涤纤维(NFC/NDF)水平日粮对泌乳后期奶牛产奶量、乳成分、血液生化及抗氧化指标的影响,采用3×3拉丁方设计,选取18头胎次、泌乳时间和泌乳量相近的荷斯坦奶牛,随机分成3组,每组6头奶牛,分别饲喂NFC/NDF比为1.38(A)、1.19(B)、1.08(C)的3种日粮,分3个阶段进行,每个阶段试验28 d,分别于第14、21、28天记录采食量和产奶量并采集奶样(50mL),第28天采集血样(10 mL)。结果显示:和A组相比,B组的血清总抗氧化能力(T-AOC)显著升高(P<0.05),丙二醛(MDA)含量显著降低(P<0.05),但产奶量、乳成分和血液生化指标无显著差异(P>0.05)。结果表明:泌乳后期适当降低日粮NFC/NDF水平对奶牛生产性能和血液生化指标无显著影响,NFC/NDF为1.19时可显著增强奶牛血清中抗氧化能力,减少丙二醛的产生,有利于维持奶牛健康生产。

    2018年06期 v.50;No.395 29-32页 [查看摘要][在线阅读][下载 121K]
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  • N-氨甲酰谷氨酸对育肥猪血清及肌肉中氨基酸水平的影响

    于青云;杨开伦;邵伟;余雄;

    为了研究日粮中添加不同水平N-氨甲酰谷氨酸(NCG)对育肥猪血清及肌肉中氨基酸水平的影响,选用420头日龄体重接近的"杜×长×大"三元杂交猪,随机分为4个处理,对照组饲喂基础日粮,其他3个试验组分别在基础日粮中添加0.05%、0.1%和0.15%的NCG,每个处理3个重复,每个重复35头,预饲期为3 d,正试期为44 d。结果显示:日粮中添加不同含量的NCG,血清中的丝氨酸、组氨酸和谷氨酰胺浓度均显著上升(P<0.05),精氨酸和蛋氨酸浓度呈现上升趋势,但差异不显著(P>0.05),添加0.1%NCG组,半胱氨酸浓度显著高于对照组(P<0.05);日粮中添加不同含量的NCG,肌肉中的氨基酸浓度均无显著差异(P>0.05),但添加0.05%NCG组氨基酸浓度及总氨基酸浓度均比对照组高(P>0.05)。结果表明:日粮中添加NCG能够提高育肥猪血清中丝氨酸、谷氨酰胺和组氨酸的浓度,但对肉中氨基酸无显著影响。

    2018年06期 v.50;No.395 33-36页 [查看摘要][在线阅读][下载 115K]
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  • 钙敏感受体基因在大鼠不同组织的表达分析

    王超;康翠翠;县怡涵;虞德夫;朱伟云;杭苏琴;

    为了研究钙敏感受体(calcium-sensing receptor,CaSR)基因在大鼠不同组织的相对表达差异,探索其在不同组织上的潜在功能,随机选取7周龄左右的雌性及雄性SD大鼠各5只,采用实时荧光定量PCR技术检测CaSR基因在大鼠胃肠道(胃、十二指肠、空肠、回肠)、代谢器官(肝脏、肾脏)及生殖器官(睾丸、附睾、子宫、卵巢)的相对表达量。结果显示:胃CaSR基因表达量显著高于其他肠段(P<0.05);肾脏CaSR基因表达量显著高于肝脏(P<0.05);睾丸CaSR基因的表达量显著高于附睾(P<0.05);子宫与卵巢的表达量较低,且二者无显著差异(P>0.05)。结果表明:CaSR基因在雌性、雄性大鼠的胃肠道、代谢器官以及生殖器官组织中均有表达,且在各组织间的表达存在显著差异。

    2018年06期 v.50;No.395 37-40页 [查看摘要][在线阅读][下载 568K]
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基础兽医

  • 表达靶向牛病毒性腹泻病毒shRNA的绵羊胎儿成纤维细胞的制备和鉴定

    魏军昌;陈创夫;乔军;侯晓旭;马齐蔓;姚洋;李村院;李晓悦;倪伟;胡圣伟;

    为了获得具有抗牛病毒性腹泻病毒(BVDV)能力的绵羊胎儿成纤维细胞,采用组织块和酶消化法分离培养绵羊胎儿成纤维细胞,利用脂质体转染法将shRNA转基因表达载体转染绵羊胎儿成纤维细胞,经抗性筛选获得抗性细胞克隆,利用PCR方法对获得的细胞克隆进行鉴定,用BVDV侵染转基因细胞,利用real-time PCR和病毒滴定测定法分析不同细胞克隆抑制BVDV复制的能力。结果显示:试验成功构建了靶向BVDV表达shRNA的转基因表达载体pNeo-2loxp-u6-sh BVDV,经抗性筛选共获得22个抗性细胞克隆;22个细胞克隆中12个细胞克隆含有目的基因,为转基因细胞,其中5个转基因细胞克隆具有明显的抗BVDV复制的能力,最高抗病毒效率达到90.7%。结论:在细胞水平能有效抑制BVDV病毒增殖的转基因绵羊胚胎成纤维细胞的获得,为进一步利用体细胞核移植技术制备转基因绵羊提供了合适的供体细胞。

    2018年06期 v.50;No.395 41-46页 [查看摘要][在线阅读][下载 775K]
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  • 柱前手性衍生化-高效液相色谱法测定奶山羊瘤胃液中iE-DAP的浓度

    汪艳;张欢敏;常广军;沈向真;

    为了研究高精料日粮模式下丁酸钠对奶山羊瘤胃液中i E-DAP含量的影响,选取10头萨能奶山羊,随机分为高精料组和丁酸钠调控组,建立一种柱前手性衍生化-高效液相色谱(HPLC)法检测γ-D-谷氨酸-内消旋-二氨基庚二酸(iE-DAP)含量,并以邻苯二甲醛(OPA)和N-乙酰基-L半胱氨酸(NAC)为衍生化试剂,以0.05 mol/mL醋酸铵-乙腈(90∶10,V∶V)为流动相,紫外检测器检测波长345 nm。结果显示:在优化的色谱条件下,iE-DAP检测浓度在5~500μg/mL范围内线性关系良好,日内、日间精密度分别为5.35%、6.50%;与高精料组相比,丁酸钠调控组奶山羊瘤胃液中iE-DAP含量极显著降低(P<0.01)。结果表明:试验建立的方法可行,可用于奶山羊瘤胃液中iE-DAP含量的测定。

    2018年06期 v.50;No.395 47-51页 [查看摘要][在线阅读][下载 582K]
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  • 地昔尼尔乳剂在绵羊体内的药动学研究

    仇亚伟;李松玲;季辉;彭麟;滕佩;刘晓晓;马俊晓;江善祥;

    为建立高效液相色谱法(HPLC)测定绵羊血浆中地昔尼尔的质量浓度,比较健康绵羊经皮肤浇泼地昔尼尔乳剂和进口地昔尼尔乳剂(Clik~)后的药动学特征及生物利用度,选用12头健康绵羊随机分为地昔尼尔乳剂组和Clik~组,公母各半,并以35 mg·kg-1的剂量于背正中线浇泼给药,在不同时间点内于颈静脉处采血,分离血浆,采用HPLC测定地昔尼尔的血药浓度。结果显示:地昔尼尔在20~10 000 ng·mL~(-1)浓度范围内线性良好,r~2>0.999,定量限(LOQ)为20 ng·mL~(-1);地昔尼尔以定量限、低、中、高(20、100、1 000、10 000 ng·mL~(-1))4个浓度添加水平的回收率均大于80%,精密度均小于15%;地昔尼尔乳剂组药动学参数:消除半衰期(T_(1/2λz))=(25.35±7.50)h,达峰时间(T_(max))=(46.00±4.90)h,达峰浓度(C_(max))=(473.73±102.53)ng·mL~(-1),药时曲线下面积(AUC_(0→t))=(20 856.38±4 178.93)ng·mL~(-1)·h;Clik~组药动学参数:T_(1/2λz)=(33.91±10.54)h,T_(max)=(44.00±6.20)h,C_(max)=(469.08±126.34)ng·mL~(-1),AUC0→t=(23 475.42±6 845.78)ng·mL~(-1)·h;地昔尼尔乳剂的相对生物利用度为88.84%。结果表明:该方法专属性强、重复性好、灵敏度高,适用于地昔尼尔在绵羊体内的药动学研究。

    2018年06期 v.50;No.395 52-56页 [查看摘要][在线阅读][下载 537K]
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  • 复方甘草酸单铵保护内毒素/恩诺沙星诱导的鸡肝细胞损伤机制研究

    郭雪文;李文洋;安冉;余祖功;

    为了探索内毒素(LPS)和恩诺沙星(ENR)联合诱导鸡原代肝细胞损伤机制以及复方甘草酸单铵(CAG)的保护作用,采用改良二步灌流法分离鸡原代肝细胞,MTT法测定细胞存活率并且筛选出LPS联合ENR(LPS/ENR)致鸡肝细胞损伤的最佳剂量和CAG的保护浓度,收集细胞上清液测定丙氨酸氨基转移酶(ALT)和谷氨酸氨基转移酶(AST)的含量,流式细胞计数仪测定细胞凋亡率,RT-qPCR检测含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)、Caspase-9、细胞色素-C(Cyt-C)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)的mRNA表达水平。结果显示:LPS/ENR的最佳浓度为(30+80)μg/mL;与对照组相比,上清中ALT(P<0.01)和AST(P<0.01)极显著升高;流式细胞计数显示LPS/ENR处理后早期细胞凋亡率极显著升高(P<0.01);在CAG处理组,早期细胞凋亡率成浓度依赖性降低;LPS/ENR组Caspase-3(P<0.05)、Caspase-9(P<0.01)、Cyt-1 C(P<0.01)、Bax(P<0.05)的mRNA表达水平显著升高,Bcl-2明显降低。结果表明:LPS/ENR诱导的肝细胞损伤可能是通过凋亡实现的,CAG能够预防这种损伤。

    2018年06期 v.50;No.395 57-61页 [查看摘要][在线阅读][下载 1808K]
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预防兽医

  • 山羊重组IL-17A克隆表达与生物活性分析

    王雯娟;王强强;田晓薇;陆明敏;严若峰;徐立新;宋小凯;李祥瑞;

    为了分析山羊白介素17A(IL-17A)对山羊单核、中性粒细胞功能的影响,采用RT-PCR方法对山羊IL-17A基因进行克隆,并在体外表达得到重组蛋白质(rIL-17A),以不同质量浓度的重组蛋白rIL-17A(5、10、20、40μg/mL)与单核细胞和中性粒细胞共孵育,测定rIL-17A对山羊单核细胞和中性粒细胞的迁移、中性粒细胞凋亡的免疫调节效应。结果显示:5、20、40μg/mL的rIL-17A能够极显著促进山羊单核细胞的迁移(P<0.01),10μg/mL的rIL-17A也能显著促进山羊单核细胞的迁移(P<0.05);与中性粒细胞共孵育时,10μg/mL(P<0.05)和20、40μg/mL(P<0.001)的rIL-17A能显著或极显著促进山羊中性粒细胞的迁移;20μg/mL(P<0.05)、40μg/mL(P<0.001)的rIL-17A能显著或极显著诱导山羊中性粒细胞的凋亡。结果表明:重组蛋白rIL-17A具有良好的生物学活性,能在体外不同程度地促进山羊单核细胞、中性粒细胞的迁移及中性粒细胞的凋亡。

    2018年06期 v.50;No.395 62-67页 [查看摘要][在线阅读][下载 1181K]
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  • 利用MS2识别序列标签纯化技术富集猪链球菌小RNA结合蛋白

    张寿明;唐欢宇;吴宗福;

    为建立理想的猪链球菌RNA结合蛋白筛选方法,以该菌小RNA rss04和rss06为研究对象,通过纯化MS2序列识别蛋白MS2-MBP,构建表达MS2融合RNA(MS2-rss04与MS2-rss06)的质粒p SET2-MS2-rss04、pSET2-MS2-rss06及阴性对照质粒p SET2-MS2-negative,将上述质粒分别电转化至猪链球菌小RNA缺失株Δrss04、Δrss06及野生株P1/7,通过MS2识别序列标签纯化,收集洗脱液,提取RNA。结果显示:表达MS2融合RNA的样品,rss04和rss06分别富集16倍和110倍,而阴性对照组未检测到rss04和rss06的富集。结果表明:MS2识别序列纯化体系成功建立,可用于猪链球菌RNA结合蛋白的筛选,为深入研究猪链球菌小RNA功能提供技术平台。

    2018年06期 v.50;No.395 68-73页 [查看摘要][在线阅读][下载 431K]
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  • 猪链球菌2型SstF蛋白对杆菌肽耐药性及毒力的影响

    刘瑾;陈申申;张越;钟孝俊;潘子豪;姚火春;

    为了探究猪链球菌2型ZY05719中ATP结合蛋白SstF对杆菌肽耐药性及毒力的作用,利用同源重组方法构建了基因缺失株ΔSstF,并检测其生物学特性、杆菌肽耐药性及致病性。结果显示:通过荧光定量PCR发现,在添加杆菌肽的培养基中sstF基因出现高转录水平,是无杆菌肽培养时的37倍(P=0.000 5);最小抑菌浓度试验显示,与野生株相比,ΔSstF对杆菌肽的耐药性下降了4倍;动物试验发现ΔSstF对BALB/c小鼠和斑马鱼的毒力明显降低,LD50分别是野生株的2.67倍和10倍;细胞黏附试验表明ΔSstF对HEp-2细胞的黏附水平为野生株的65%(P=0.0021)。结果表明:SstF蛋白介导猪链球菌对杆菌肽的耐受,且为猪链球菌的毒力因子,促进细菌对宿主的致病性。

    2018年06期 v.50;No.395 74-79页 [查看摘要][在线阅读][下载 749K]
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  • 青蒿素与癸氧喹酯联用对鸡柔嫩艾美耳球虫感染的预防作用

    黄杰;江燕;王安源;吴阳阳;殷邵杰;刘明江;李金贵;

    为了评价青蒿素(artemisinin,ART)和癸氧喹酯(decoquinate,DQ)对球虫病的预防作用,选用柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)的孢子化卵囊(6×104个/只)接种15日龄仔鸡制备球虫病模型,将肉鸡分为空白对照组、感染对照组、ART处理组、DQ处理组以及联合用药(ART+DQ)处理组,进行相对增重率、存活率、盲肠病变、卵囊数及抗球虫指数(anticoccidial index,ACI)的记录和测定。结果显示:感染对照组出现少量死亡,盲肠病变严重,增重率较低;药物处理组盲肠病变情况明显改善,和感染对照组比增重率明显升高,其中ART+DQ组显著升高(P<0.05);盲肠组织HE染色结果趋势一致;ART、DQ以及ART+DQ组的ACI分别为157.2,186.6和205.5。结果表明:ART对柔嫩艾美耳球虫感染的预防效果不如DQ,两者联合应用具有明显协同作用。

    2018年06期 v.50;No.395 80-84页 [查看摘要][在线阅读][下载 1349K]
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  • 牦牛感染牛病毒性腹泻病毒的诊断与病毒分离鉴定

    马文瑞;赵庆奎;李丰清;张生祥;

    为了探讨牦牛养殖场发病犊牛的致病原及其生物学特征,采用临床诊断和病毒分离方法对犊牛进行诊断,并对分离毒株E0基因测序分析后进行同源性比较和遗传进化分析。发病犊牛临床主要表现出体温升高、食欲减退、口腔黏膜溃疡、水样腹泻、粪便带有血液和肠黏膜等典型牛病毒性腹泻病毒(BVDV)感染症状。病牦牛的鼻黏液、粪便样品接种牛肾传代细胞(MDBK)出现明显的细胞病变。该分离毒株的效价达到TCID_(50)为10~(-5.19)/0.1 mL,能被BVDV阳性血清所中和,BVDV间接免疫荧光试剂盒检测为阳性。其E0基因核苷酸序列与GenBank上登录的BVDV-1b亚型同源性高达99.5%。结果表明:该牦牛养殖场疫情为BVDV感染,分离获得的毒株为我国BVDV毒株资源与分子流行病学提供了资料。

    2018年06期 v.50;No.395 85-89页 [查看摘要][在线阅读][下载 1563K]
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  • 2016年16种畜牧、兽医科学类期刊主要指标 《畜牧与兽医》综合排名第8位

    <正>《中国科技期刊引证报告》选用的是中国科技论文统计源期刊,即中国科技核心期刊,这些期刊是由中国科学技术研究所经过严格的定量和定性分析的基础上选取的各个学科的重要科技期刊。《2017年版中国科技期刊引证报告(核心版)自然科学卷》中收录了在中国(不含港澳台地区)正式出版的2008种"中国科技核心期刊(中国科技论文统计源期刊)",《畜牧与兽医》

    2018年06期 v.50;No.395 89页 [查看摘要][在线阅读][下载 79K]
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预防兽医

  • 沙门菌鞭毛蛋白免疫佐剂效应关键位点的研究

    章纳;崔耀明;李新锋;张安让;

    为了研究沙门菌鞭毛蛋白发挥免疫佐剂效应的关键位点,获得新型高效的蛋白免疫佐剂,从实验室保藏的质粒中通过双酶切方法获得了分别编码野生沙门菌鞭毛蛋白、D1保守区N端第88~96位氨基酸突变鞭毛蛋白、D1保守区C端第411位丙氨酸突变鞭毛蛋白、高变区第183~279位缺失鞭毛蛋白SJW61的目的基因,连接入原核表达质粒pET30a+,并转化入大肠杆菌BL21(DE3)中,以IPTG诱导表达;SDS-PAGE和Western blot鉴定目的蛋白;分别以4种鞭毛蛋白混合卵清白蛋白(OVA)免疫C57BL/6小鼠,二免后收集血清ELISA检测OVA蛋白特异性抗体效价;取脾脏细胞ELISPOT法检测特异性IFN-γ及IL-4分泌细胞。结果显示:4种原核表达的鞭毛蛋白均以胞内可溶形式表达;Western blot分析显示,4种蛋白均具有良好的免疫原性;动物结果表明,4种原核表达的鞭毛蛋白及其突变体均能显著增强OVA蛋白的特异性免疫应答(P<0.05),且免疫应答趋向于Th2型(P<0.05),其中D1保守区N端第88~96位氨基酸突变鞭毛蛋白佐剂效应显著弱于其余3种鞭毛蛋白(P<0.05),高变区缺失鞭毛蛋白SJW61佐剂效应略有降低(P>0.05)。

    2018年06期 v.50;No.395 90-94页 [查看摘要][在线阅读][下载 757K]
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  • 华南地区猪圆环病毒3型感染的分子流行病学调查与分析

    刘相聪;申翰钦;张鹏飞;黎嘉豪;刘燕玲;张乐宜;宋长绪;

    为了解猪圆环病毒3型(porcine circovirus 3,PCV3)在我国华南地区的感染情况,从2016年12月到2017年12月期间,从广东、广西、海南、福建、江西和湖南的177家规模化猪场采集1 078份病料,利用PCR技术检测PCV3的流行情况,并对PCV3阳性病料进行全基因组测序分析。结果显示:样品阳性率为29.04%(313/1 078),猪场阳性率为44.63%(79/177);从病料中测得的10株PCV3毒株全基因组核苷酸序列相似性为98.8%~100%,与国内外其他毒株的同源性在98.2%~100%之间;全基因组遗传进化分析显示PCV3遗传进化可以分为PCV3a和PCV3b,其中毒株CHN/HUNAN、CHN/GD-SH和CHN/GD-ZQ属于以美国毒株US/MO2016为代表的PCV3a分支,其余7个毒株属于PCV3b分支。结果表明:PCV3广泛存在于华南地区的猪群中,其基因组在不断进化,对PCV3的流行与致病机理有待进一步研究。

    2018年06期 v.50;No.395 95-100页 [查看摘要][在线阅读][下载 4446K]
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  • 断奶仔猪PRRS抗体动态与感染状态监测及免疫策略分析

    曲向阳;赖清华;刘媛媛;孙英军;任夫波;夏天;周明明;杨汉春;

    为了评估"母猪场+合作育肥"生产模式下猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)稳定的某母猪群所生产仔猪的PRRSV感染状态,将断奶仔猪按周龄分配至不同育肥场内饲养,1年内不同季节分别选取5、8、12、16、21周龄呼吸道症状较严重的猪群进行PRRSV抗体动态与感染状态监测。结果显示:每年免疫3次PRRSV减毒活疫苗(MLV)时,母猪群抗体S/P值为(0.959±0.618),83.3%样品抗体阳性,母源抗体可持续至35~56日龄;35与56日龄的抗体阳性率分别为55%、20%,ELISA S/P值分别是(0.30±0.16)、(0.13±0.12);全部育肥猪PRRSV感染率仅4%,冬春季节呼吸道疾病与死淘率高于夏秋季,但育肥猪PRRSV感染没有明显季节性。结果表明:"母猪场+合作育肥"生产模式下,当母猪场PRRSV稳定且断奶仔猪不免疫PRRSV疫苗时,仔猪PRRSV感染风险较低,取得的经济性较佳,应重点维持母猪场PRRSV稳定。

    2018年06期 v.50;No.395 101-104页 [查看摘要][在线阅读][下载 345K]
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  • 奶牛乳房炎病原菌的分离鉴定及药物敏感试验

    阮智杨;陈新;孙雯;JUNG Yong-Sam;钱莺娟;

    为了解2016年春夏季安徽某奶牛场奶牛乳房炎的病原菌及主要致病菌的耐药性情况,采用PCR方法对奶牛场74份乳房炎病牛奶样及30份垫料样品中分离的菌落进行鉴定。结果显示:分离得到4种致病菌,共计147株,其中大肠杆菌108株,金黄色葡萄球菌8株,乳房链球菌29株,停乳链球菌2株;药敏试验显示,青霉素、阿莫西林和庆大霉素对引起该奶牛场的4种病原菌有较好的抑制作用。

    2018年06期 v.50;No.395 105-109页 [查看摘要][在线阅读][下载 114K]
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  • 欢迎订阅2018年《畜牧与兽医》

    <正>倡导健康养殖新理念解读疫病防控新技术《畜牧与兽医》渊源悠长,1935年创刊,是全国最早公开发行的畜牧、兽医类国家级科技期刊。现由教育部主管、南京农业大学主办。始终遵循"为社会服务,为畜牧生产服务"和"理论与实践相结合,普及与提高并举"的办刊宗旨。本刊被美国化学文摘收录,是全国中文核心期刊、江苏期刊方阵期刊、华东地区优秀

    2018年06期 v.50;No.395 109页 [查看摘要][在线阅读][下载 82K]
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预防兽医

  • 13种兽用抗菌药对大肠杆菌及沙门菌的体外抑菌效果

    王虹;杨德鸿;汤芳;李亚芯;徐长青;胡贺;张永春;任建鸾;

    为了解目前市售抗菌药对畜牧生产中常见病原菌的抑菌作用,选用13种常见抗菌药,对参考菌株大肠杆菌(ATCC25922)进行了最小抑菌浓度(MIC)测定,并挑选其中抑菌效果相对较好的药物对来自河南省和江苏省各集约化禽类养殖场分离鉴定所得的39株大肠杆菌和沙门菌进行了MIC测定。结果显示:药物D(10%阿莫西林)、药物G(100 g∶10 g硫酸黏菌素)、药物I(100 mL∶25 g磺胺嘧啶、5 g甲氧苄啶)、药物J(100 mL∶磺胺间甲氧嘧啶钠10 g、甲氧苄啶2 g)、药物L(100 mL∶10 g氟苯尼考)抑菌效果较好(MIC<78.12μg/mL),药物E(5%盐酸多西环素)、药物F(10%盐酸多西环素)的抑菌效果次之(MIC为156.25μg/mL),药物B(100 g∶3.25 g硫酸新霉素)和K(5 g戊二醛、5 g葵甲溴铵)的抑菌效果较差(MIC<625μg/mL),药物A(10%盐酸林可霉素)、药物C(100 g∶10 g A型酒石酸泰乐菌素)、药物H(100 g∶5 g硫氰酸红霉素)、药物M(聚维酮碘)抑菌效果最差,所有稀释倍数均长菌;挑选的抑菌效果较好的药物MIC结果显示,药物I对39个临床菌株均无效,药物L对5株临床菌株有效,药物E对23株临床菌株有效。结果表明:药物E可用于大肠杆菌、沙门菌感染的抗菌治疗。

    2018年06期 v.50;No.395 110-113页 [查看摘要][在线阅读][下载 114K]
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  • 肠出血性大肠杆菌强定殖株中新的双组份系统的鉴定

    杨永武;张昕杨;张雪寒;何孔旺;蔡文通;李干武;

    为了比较7株肠出血性大肠杆菌O157∶H7的定殖能力,采用灌胃感染的方式,将7株肠出血性大肠杆菌分别感染小鼠。对粪便中的细菌以及盲肠内定殖的细菌进行分离、计数,发现牛源菌株C1的定殖能力最强,且定殖维持时间最长。对C1菌株的基因组序列分析得到1对功能未知的双组份调节系统(TCS),N5512/N5520。PCR检测显示N5512/N5520存在于绝大多数肠出血性大肠杆菌O157∶H7临床分离株(98.5%),而在其他致病型的大肠杆菌中没有检测到。本研究为大肠杆菌O157∶H7的定殖和致病机制研究奠定了基础。

    2018年06期 v.50;No.395 114-117页 [查看摘要][在线阅读][下载 308K]
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临床兽医

  • 辽宁某牛场奶牛隐性乳房炎源链球菌耐药性研究

    郭玉茹;徐程程;裘鹏;刘耀川;张德显;刘世佳;刘明春;

    为了解辽宁阜新某奶牛场奶牛隐性乳房炎发生情况,采用体细胞计数法对奶牛场中94头临床表现健康的奶牛进行隐性乳房炎筛查,对检测后的阳性乳样进行链球菌的分离鉴定,并采用微量肉汤稀释法对分离所得的链球菌进行药敏试验。结果显示:该牛场奶牛隐性乳房炎的检出率为48.94%;对34株奶牛隐性乳房炎链球菌分离株进行体外药敏试验,发现菌株对头孢氨苄、磺胺间甲氧嘧啶和磺胺甲基异恶唑耐药率最高(100%);对苯唑西林、阿奇霉素、林可霉素、多西环素、土霉素、红霉素的耐药率均在82.4%以上;对氨苄西林、阿莫西林和环丙沙星较敏感,敏感率分别为44.1%、50.0%及52.9%。结果表明:该奶牛场隐性乳房炎源链球菌多重耐药现象严重。

    2018年06期 v.50;No.395 118-121页 [查看摘要][在线阅读][下载 167K]
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  • 精蛋白锌胰岛素治疗猫糖尿病并发急性肾衰病例分析

    翟晓虎;朱庆;周媛丽;狄和双;贺卫华;

    为了研究长效胰岛素精蛋白锌胰岛素对猫糖尿病并发急性肾衰病例的治疗效果,采用精蛋白锌胰岛素(PZI)控制血糖,早、晚餐前1 h时按0.5 U/kg皮下注射PZI,每隔2 h检测1次血糖浓度并作血糖曲线,同时按40 mL/kg、15 mL/h静脉输液乳酸林格氏液和生理盐水。结果显示:经过2周治疗,血糖降至8.33 mmol/L,肌酐和尿素氮恢复到正常范围;无氮质血症症状、酮症酸中毒症状已基本消失,尿酮体已降至阴性。结果表明:皮下注射精蛋白锌胰岛素结合输液疗法能够有效控制血糖及纠正急性肾衰,从而达到延长动物生命的目的。

    2018年06期 v.50;No.395 122-124页 [查看摘要][在线阅读][下载 238K]
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  • 中牟县某奶牛场奶牛乳房炎的发生规律分析

    马发顺;邢琦;宋玉伟;梁秀丽;

    为了掌握奶牛乳房炎的发生规律,通过对河南省中牟县某奶牛场随机抽样500头奶牛的乳房炎检测,获得临床型和隐性型乳房炎的一系列相关数据,并对奶牛乳房炎的发生与胎次、月份、泌乳时期、分娩头数、乳区、日产奶量等之间的关系进行统计分析。结果显示:各胎次之间奶牛乳房炎发生存在极显著差异(P<0.01),胎次与总阳性率、临床阳性率、隐性阳性率之间的相关系数分别为0.826 8(P<0.01)、0.928 8(P<0.01)、0.663 8(P>0.05);各月份之间奶牛乳房炎发生率差异显著(P<0.05);而临床型与隐性型间差异极显著(P<0.01),二者之间的相关系数为0.992 6(P<0.01);随着泌乳时期延长奶牛乳房炎发生率有增高的趋势,且二者间具有极显著的相关性(P<0.01);各月份的分娩头数与临床型、隐性型乳房炎间的相关系数分别为0.858 6(P<0.01)、0.862 6(P<0.01);4个乳区乳房炎发生率差异不显著(P>0.05),前后乳区间、左右乳区间也差异不显著(P>0.05);日产奶量4个水平之间阳性率差异不显著(P>0.05),而日产奶量与总阳性率、临床阳性率、隐性阳性率间的相关系数分别为-0.961 9、-0.910 4、-0.946 5,三者均极显著(P<0.01)。本研究结果可为有效防治奶牛乳房炎疾病提供参考。

    2018年06期 v.50;No.395 125-128页 [查看摘要][在线阅读][下载 106K]
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  • 奶牛乳清H_2O_2水平的检测及意义评价

    沈文祥;周晓静;何寒姣;黄丽瑾;李燕琳;吴桂明;杜玉兰;何宝祥;

    为了探索奶牛乳清H_2O_2水平及其意义,在南宁市某奶牛场随机选取122头泌乳奶牛分4次采集乳样,记录奶牛临床健康情况、检测乳汁体细胞数(SCC),分离乳清并检测H_2O_2含量,分析乳清H_2O_2含量与奶牛疾病、乳品质量的关系。结果显示:疾病组奶牛乳清H_2O_2平均含量显著高于健康组奶牛(P<0.05);乳汁SCC与乳清H_2O_2含量极显著正相关(r=0.729,P<0.001);乳优组乳清H_2O_2含量显著低于乳差组(P<0.05)。提示:乳清H_2O_2可作为判断乳品质量和临床检测奶牛乳房炎等疾病辅助诊断指标。

    2018年06期 v.50;No.395 129-131页 [查看摘要][在线阅读][下载 184K]
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专题论述

  • 山羊传染性胸膜肺炎分子诊断方法的研究进展

    朱建勋;郝华芳;陈胜利;颜新敏;赵萍;翟肖辉;刘永生;储岳峰;

    山羊传染性胸膜肺炎(contagious caprine pleuropneumonia,CCPP)是由山羊支原体山羊肺炎亚种(Mycoplasma capricolum subsp.capripneumoniae,MCCP)引起的山羊急性或慢性呼吸道传染病,其病原MCCP的分离培养困难,同丝状支原体簇其他成员之间具有相似的生化和血清学性质,因此用传统的病原学和血清学方法无法对其进行准确鉴定。而基于PCR的分子检测技术,凭借其特异性高和敏感性强等诸多优点已被广泛应用于疾病的早期临床诊断。本文综述了CCPP的分子诊断方法,以期为该病的防治提供技术参考。

    2018年06期 v.50;No.395 132-136页 [查看摘要][在线阅读][下载 134K]
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简报

  • 发情羊血清和血清白蛋白对幼龄杜寒羊体外受精效果的影响

    罗惠娣;毛杨毅;张冠武;赵鹏;李希;李春艳;周胜花;吴苏君;郭慧慧;李俊;

    <正>哺乳动物体外受精技术(in vitro fertilization,简称为IVF)是指哺乳动物的精子和卵子在体外人工控制的环境中完成受精过程的技术。它由精子采集、体外获能和卵母细胞采集、体外成熟、受精、受精卵培养等技术组成。目前已有10多种哺乳动物的"试管动物"相继出生。但在羊的体外受精技术研究中,一直存在着精子获能效果差和卵母细胞卵裂率低等问题。迄今为止,未见有关在幼龄绵羊的卵母细胞体外

    2018年06期 v.50;No.395 137-138页 [查看摘要][在线阅读][下载 95K]
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  • 饲粮蛋白、磷水平对塔里木马鹿产茸量的影响

    刘蕾;王梦霖;李瑾贤;钱文熙;

    <正>塔里木马鹿为马鹿的新疆特有亚种,主要分布在塔里木河及其支流沿岸,具有耐粗饲、产茸力高的优良品质,是新疆3种马鹿亚种(塔里木马鹿、天山马鹿、阿勒泰马鹿)中单位体重产茸量最高的一种(时孔民,1994),种公鹿鲜茸平均单产最高年达12.61千克(杨德胜,1997)。研究发现,鹿茸的生长发育与自身的激素调节、营养水平、自然环境等有关(高秀华等,2001)。在营养因素中,饲粮蛋白质

    2018年06期 v.50;No.395 139-141页 [查看摘要][在线阅读][下载 101K]
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